乳酸脱氢酶(LDH或LD)是糖无氧酵解及糖异生的重要酶系之一,可催化丙酮酸与L-乳酸之间的还原与氧化反应,也可催化相关的α-酮酸。
LDH广泛存在于人体组织中,以心、肾、骨骼肌含量最高,肝、脾、胰和肺组织次之。
LDH测定方法主要有比色法和连续监测法。
- 检查部位:血液血管
- 科室:
- 空腹检查:否
- 禁忌人群:
- 参考价格:
血清乳酸脱氢酶——检查细节、注意事项、步骤、结果解读
血清乳酸脱氢酶——检查项目的不适宜人群:
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血清乳酸脱氢酶——检查项目的注意细节:
(1)比色法:
①乳酸钾、乳酸钠也可作为LDH底物,但因其为水溶液,含量不够准确,且保存不当易产生酮酸类物质,抑制酶促反应。而乳酸锂为固体,稳定,易于称量。
②除二乙醇胺缓冲液外,也可用Tris或焦磷酸缓冲液,避免了原金氏法中甘氨酸缓冲液对LDH的抑制作用,提高了阳性检出率。
③比色应在5~15min内完成,否则吸光度降低。
④结果>2500U时,可用生理盐水稀释标本后再测,其结果乘以稀释倍数。
(2)连续监测法:
①标本勿溶血,当溶血达Hb0.8g/L时,LDH活性可升高58%。
②标本于室温(25℃)保存,2天内酶活性稳定,冰箱保存酶活性降低,-20℃过夜LDH3、LDH4则全部失活。
③用血清或肝素抗凝血浆测定结果满意,草酸盐可抑制LDH活性。
④复溶后溶液变浊或初始吸光度>0.5应弃去。
⑤利用正逆双向反应均可测定乳酸脱氢酶活性,但因反应温度、底物和缓冲液浓度不同,其参考区间也有差异。以乳酸和NAD为底物,在340nm监测吸光度增高速率为正向反应,以LD-L表示;以丙酮酸和NADH为底物,监测340nm吸光度下降速率为逆向反应,以LD-P表示。正逆反应两法相比,LD-L法的主要优点是:A.正向反应底物液的稳定性比逆向反应的稳定性大,前者冰箱可保存6个月以上,而后者仅几天;B.速率反应的线性范围(吸光度对监测时间t作图)较宽;C.重复性比LD-P好。由于逆向反应速度比正向反应速度快,其参考值约为LD-L的2倍。
血清乳酸脱氢酶——检查项目的一般步骤:
(1)比色法:按表1操作。
混匀,室温放置5min后,在440nm波长,比色杯光径1.0cm,蒸馏水调零点,读取各管吸光度,以AU-AC之差值查标准曲线,求出LDH活力单位。
附注:
①乳酸钾、乳酸钠也可作为LDH底物,但因其为水溶液,含量不够准确,且保存不当易产生酮酸类物质,抑制酶促反应。而乳酸锂为固体,稳定,易于称量。
②除二乙醇胺缓冲液外,也可用Tris或焦磷酸缓冲液,避免了原金氏法中甘氨酸缓冲液对LDH的抑制作用,提高了阳性检出率。
③比色应在5~15min内完成,否则吸光度降低。
④结果>2500U时,可用生理盐水稀释标本后再测,其结果乘以稀释倍数。
(2)连续监测法:各实验室可根据本室生化自动仪型号及说明书操作。主要参数为340nm波长,37℃,吸样量500μl,连续监测时间60s,标本与试剂体积之比为1∶50。
血清乳酸脱氢酶——检查项目结果解读:
(1)比色法:按表1操作。
混匀,室温放置5min后,在440nm波长,比色杯光径1.0cm,蒸馏水调零点,读取各管吸光度,以AU-AC之差值查标准曲线,求出LDH活力单位。
附注:
①乳酸钾、乳酸钠也可作为LDH底物,但因其为水溶液,含量不够准确,且保存不当易产生酮酸类物质,抑制酶促反应。而乳酸锂为固体,稳定,易于称量。
②除二乙醇胺缓冲液外,也可用Tris或焦磷酸缓冲液,避免了原金氏法中甘氨酸缓冲液对LDH的抑制作用,提高了阳性检出率。
③比色应在5~15min内完成,否则吸光度降低。
④结果>2500U时,可用生理盐水稀释标本后再测,其结果乘以稀释倍数。
(2)连续监测法:各实验室可根据本室生化自动仪型号及说明书操作。主要参数为340nm波长,37℃,吸样量500μl,连续监测时间60s,标本与试剂体积之比为1∶50。
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