PHA淋巴细胞转化试验

• 检查部位：血液血管
• 科室：肿瘤科,急诊科放疗、化疗科
• 空腹检查：否
• 禁忌人群：
• 参考价格：

PHA淋巴细胞转化试验——检查细节、注意事项、步骤、结果解读

PHA淋巴细胞转化试验——检查项目的不适宜人群：

PHA淋巴细胞转化试验——检查项目的注意细节：

1.培养基成分对转化率影响较大，注意其有效期。

2.小牛血清用前需灭活。

3.培养时要保证有足够的气体，一般10ml培养瓶内液体总量不要超过2ml。

4.PHA剂量过大对细胞有毒性，太小不足以刺激淋巴细胞转化，试验前应先测定PHA转化反应剂量。

5.实验中要严格无菌操作，防止污染。

不合宜人群：暂时不明。

检查前禁忌：注意健康的饮食，保持良好的心情。

检查时要求：积极配合医生。

PHA淋巴细胞转化试验——检查项目的一般步骤：

操作方法：

1.取无菌肝素抗凝血0.lml，加入1.8ml细胞培养液中，同时加入1000μg/m1PHA0.1m1，对照管不加PHA，将细胞置37℃、5%CO2培养3d，每天摇动1次。

2.培养结束时吸弃大部分上清液，加入8.5g/LNH4Cl4ml混匀，置37℃水浴10min。

3.2500r/min离心10min，弃上清液，沉淀加5ml固定液，室温作用5min。

4.2500r/min离心10min，弃上清液，留0.2ml沉淀细胞制片，迅速吹干。

5.吉姆萨染液染色10～20min，水洗，干燥。

6.油镜计数200个淋巴细胞中转化的细胞数，计算转化率。

结果判断：

1.淋巴母细胞的形态学标准细胞核的大小、核与胞浆的比例、胞浆染色性及核的构造与核仁的有无。

⑴成熟的小淋巴细胞：与未经培养的小淋巴细胞大小一样，为6～8μm，核染色致密，无核仁，核与胞浆比例大，胞浆染色为轻度嗜碱性。

⑵过渡型淋巴细胞：比小淋巴细胞大，约10～20μm，核染色致密，但出现核仁，此为与成熟小淋巴细胞鉴别要点。

⑶淋巴母细胞：细胞体积增大，约20～30μm，形态不整齐，常有小突出，核变大，核质染色疏松，有核仁1～2个，胞浆变宽，常出现胞浆空泡。

⑷其它细胞：如中性粒细胞在培养72h后，绝大部分衰变或死亡呈碎片。

2.淋巴细胞转化率的计算按上述分类检查推片头、体、尾三部分，计数200个淋巴细胞，算出百分率。转化的淋巴细胞包括淋巴母细胞和过渡型淋巴细胞，未转化的淋巴细胞指的是成熟的小淋巴细胞。在正常情况下，PHA诱导的淋巴细胞转化率为60～80%，如为50～60%则偏低，50%以下则为降低。

再根据结果得出正确的判断。

PHA淋巴细胞转化试验——检查项目结果解读：

操作方法：

1.取无菌肝素抗凝血0.lml，加入1.8ml细胞培养液中，同时加入1000μg/m1PHA0.1m1，对照管不加PHA，将细胞置37℃、5%CO2培养3d，每天摇动1次。

2.培养结束时吸弃大部分上清液，加入8.5g/LNH4Cl4ml混匀，置37℃水浴10min。

3.2500r/min离心10min，弃上清液，沉淀加5ml固定液，室温作用5min。

4.2500r/min离心10min，弃上清液，留0.2ml沉淀细胞制片，迅速吹干。

5.吉姆萨染液染色10～20min，水洗，干燥。

6.油镜计数200个淋巴细胞中转化的细胞数，计算转化率。

结果判断：

1.淋巴母细胞的形态学标准细胞核的大小、核与胞浆的比例、胞浆染色性及核的构造与核仁的有无。

⑴成熟的小淋巴细胞：与未经培养的小淋巴细胞大小一样，为6～8μm，核染色致密，无核仁，核与胞浆比例大，胞浆染色为轻度嗜碱性。

⑵过渡型淋巴细胞：比小淋巴细胞大，约10～20μm，核染色致密，但出现核仁，此为与成熟小淋巴细胞鉴别要点。

⑶淋巴母细胞：细胞体积增大，约20～30μm，形态不整齐，常有小突出，核变大，核质染色疏松，有核仁1～2个，胞浆变宽，常出现胞浆空泡。

⑷其它细胞：如中性粒细胞在培养72h后，绝大部分衰变或死亡呈碎片。

2.淋巴细胞转化率的计算按上述分类检查推片头、体、尾三部分，计数200个淋巴细胞，算出百分率。转化的淋巴细胞包括淋巴母细胞和过渡型淋巴细胞，未转化的淋巴细胞指的是成熟的小淋巴细胞。在正常情况下，PHA诱导的淋巴细胞转化率为60～80%，如为50～60%则偏低，50%以下则为降低。

再根据结果得出正确的判断。