平贝母的功效与作用(2)

　　贝母碱的测定方法检测生物碱的传统方法比较多，如酸碱滴定法、安培滴定法、两相滴定法［6］等。这些方法普遍适用于生物碱的检测，所以它们被用于估计贝母总碱的粗略含量。

　　2.1 分光光度检测法 又称酸性染料比色法，根据酸性染料溴麝香草酚蓝在pH=5.0的缓冲溶液中与贝母生物碱形成黄色离子对，此离子对被氯仿萃取后，采用分光光度计在415nm附近测定吸光度，用最小二乘法建立回归方程，由此测定生物碱含量。该方法可消除两相滴定法因终点观察困难所带来的误差，也不需要昂贵的检测仪器，是目前测定贝母生物碱类最为常用、可靠的方法。李萍等［7］采用酸性染料比色法，以去氢贝母碱为参照物，在410nm波长下测定了川贝母、浙贝母、湖北贝母和平贝母等21种贝母中的总生物碱含量。该方法灵敏、快速。

　　2.2 薄层扫描法（TLCS） 这是目前测定贝母单体生物碱最常用的方法。主要有：单波长薄层色谱法、双波长薄层扫描法、薄层-导数荧光分光光度法以及微乳薄层色谱法，最常用的是双波长扫描法。薄层板为硅胶G板，展开剂基本为3个系统，即乙酸乙酯-甲醇-氨水系统，苯(环己烷)-乙酸乙酯-二乙胺系统和乙醚-无水乙醇系统。薄层板以改良碘化铋钾喷雾显色，测定波长495~540nm，参比波长600~650nm。可用薄层扫描法定量的单体生物碱有西贝素、平贝碱甲、平贝碱乙、贝母辛、贝母甲素等。李萍等［8］曾在硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-二乙胺(6∶4∶1)为展开剂，采用改良碘化铋钾试剂显色，双波长扫描测定了暗紫贝母、甘肃贝母和裕民贝母等12种贝母20个样品的西贝素含量，从而为贝母类生药的品质评价提供了依据。这种方法简便，结果稳定。