平贝母的功效与作用(3)

　　2.3 气相色谱法(GC) 李松林等［9］采用柱前衍生气相色谱法，先使三甲基硅烷咪唑(TMSI)与贝母异甾体生物碱反应生成衍生物，以正三十烷为内标，对国产16种药用贝母中活性异甾体生物碱进行了分析研究，认为该方法重现性好、灵敏度高、操作较为简便。有学者还尝试采用直接气相色谱法，在Supelco SAC-5柱上，以氮气作为载体，对7种主要贝母异甾体生物碱进行定量分析，结果表明该方法较柱前衍生气相色谱法，具有耗时少、重现性高和高精密度等优点［10］。

　　2.4 高效液相色谱法(HPLC）

　　2.4.1 柱前衍生化HPLC法 多数贝母生物碱无共轭双键，因此单体生物碱的直接HPLC分析研究较少，仅分析过贝母药材中一个含羰基的化合物贝母辛，且检测灵敏度较低［11］。李文彦等［12］利用柱前衍生化HPLC法检测了药材中的西贝素。该法准确，检测灵敏度高，但样品预处理时间较长，衍生化试剂价格昂贵是该法的美中不足。

　　2.4.2 高效液相蒸发散射法(HPLC-ELSD) 该方法解决了大多数贝母生物碱因无紫外吸收而无法直接用HPLC定量分析这一难题。流动相为乙腈10mmol/L-NH4HCO3（浓氨水调至pH 10.1）=A∶B系统，梯度洗脱，温度恒定在40℃，ELSD参数是漂移管温度85℃，氮气压力0.2MPa，增益50［13］。朱丹妮等［14］在Silica(4.6mm×250mm，5μm)色谱柱上，以环己烷-乙酸乙酯-二乙胺(6∶4∶1)和环己烷-乙酸乙酯-二乙胺(6∶4∶0.12)为流动相，Alltech ELSD-500检测器检测，外标法测定了5种商品贝母中的贝母甲素和贝母乙素的含量。这种方法简便、精确，重现性也较好，但因为较高的实验设备要求而影响了它的推广。