血管性血友病因子在止血过程中起重要作用,除介导血小板粘附于血管的受损处外,它还作为因子Ⅷ的载体。
- 检查部位:血液血管
- 科室:
- 空腹检查:是
- 禁忌人群:
- 参考价格:
血管性血友病因子抗原——检查细节、注意事项、步骤、结果解读
血管性血友病因子抗原(vWF:,Ag)——检查项目的不适宜人群:
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血管性血友病因子抗原(vWF:,Ag)——检查项目的注意细节:
1.抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。
2.体检前一天的晚八时以后,应禁食,以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。
3.抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。
血管性血友病因子抗原(vWF:,Ag)——检查项目的一般步骤:
1)取一定量VWF∶Ag抗血清,用三羟甲基氨基甲烷-巴比妥缓冲液稀释10倍,另取5g/L琼脂糖三羟甲基氨基甲烷-巴比妥缓冲液隔水融化,冷却至56℃。然后将预温至56℃的稀释VWF∶Ag抗血清1∶60混合(视抗体效价而定),制成8cm×8cm、厚1.5mm的琼脂板,距玻板一边约2cm处打一排小孔,径孔3mm,孔间距为5mm。
(2)将琼脂板置于电泳槽内,孔朝阴极,用滤纸作盐桥,用定量注射器吸取原血浆1∶2、1∶4、1∶8、1∶16等不同倍数稀释的健康人血浆各10μl,分别加入抗体琼脂板小孔里。待检血浆样品用Tris-巴比妥缓冲稀释1倍后,加入各样品孔内。每孔加量均为10μl。
(3)电泳条件:电泳110~150V,电流约5mA/块板,时间18h,温度低于15℃。
(4)电泳完毕,取出凝胶板浸于4.4mmol/L磷钼酸染色液中20min以上,然后再放入生理盐水中浸泡10min,即可见明显火箭状沉淀峰,也可用氨基黑按常规方法染色。
(5)染色后,用双分规测量火箭电泳峰的高度(从加样孔上缘到峰顶),将标准血浆5个读数,通过回归方程得出标准曲线,然后求出各测定样品VWF∶Ag的含量,再乘以稀释倍数(×2),即样品实际浓度。表示相当于正常血浆的百分率。
血管性血友病因子抗原(vWF:,Ag)——检查项目结果解读:
1)取一定量VWF∶Ag抗血清,用三羟甲基氨基甲烷-巴比妥缓冲液稀释10倍,另取5g/L琼脂糖三羟甲基氨基甲烷-巴比妥缓冲液隔水融化,冷却至56℃。然后将预温至56℃的稀释VWF∶Ag抗血清1∶60混合(视抗体效价而定),制成8cm×8cm、厚1.5mm的琼脂板,距玻板一边约2cm处打一排小孔,径孔3mm,孔间距为5mm。
(2)将琼脂板置于电泳槽内,孔朝阴极,用滤纸作盐桥,用定量注射器吸取原血浆1∶2、1∶4、1∶8、1∶16等不同倍数稀释的健康人血浆各10μl,分别加入抗体琼脂板小孔里。待检血浆样品用Tris-巴比妥缓冲稀释1倍后,加入各样品孔内。每孔加量均为10μl。
(3)电泳条件:电泳110~150V,电流约5mA/块板,时间18h,温度低于15℃。
(4)电泳完毕,取出凝胶板浸于4.4mmol/L磷钼酸染色液中20min以上,然后再放入生理盐水中浸泡10min,即可见明显火箭状沉淀峰,也可用氨基黑按常规方法染色。
(5)染色后,用双分规测量火箭电泳峰的高度(从加样孔上缘到峰顶),将标准血浆5个读数,通过回归方程得出标准曲线,然后求出各测定样品VWF∶Ag的含量,再乘以稀释倍数(×2),即样品实际浓度。表示相当于正常血浆的百分率。
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