血清脂蛋白和血清脂蛋白电泳

• 检查部位：血液血管
• 科室：
• 空腹检查：否
• 禁忌人群：
• 参考价格：

血清脂蛋白和血清脂蛋白电泳——检查细节、注意事项、步骤、结果解读

血清脂蛋白和血清脂蛋白电泳——检查项目的不适宜人群：

血清脂蛋白和血清脂蛋白电泳——检查项目的注意细节：

血清脂蛋白和血清脂蛋白电泳——检查项目的一般步骤：

（1）将缓冲液加入电泳槽内，调节两侧槽内的缓冲液，使其处于同一平面。

（2）醋酸纤维素薄膜的准备：取醋酸纤维素薄膜（2cm×8cm）在毛面的一端（负极侧）1.5cm处用铅笔轻划一横线，做点样标记。编号，并标明正、负极后，将薄膜置于巴比妥-巴比妥钠缓冲液中浸泡，待充分浸透后（一般为20min）取出，夹于洁净滤纸中间吸去多余的缓冲液。

（3）将醋酸纤维素薄膜毛面向上贴于电泳槽支架上拉直。用微量吸管吸取无溶血血清3～5μl于横线处沿横线加样，样品应与薄膜的边缘保持一定的距离，以免电泳图谱中的蛋白区带变形，待血清渗入薄膜后，反转薄膜，使光面朝上，平直地贴于电泳槽支架上，用双层滤纸或四层纱布将薄膜的两端与缓冲液连通，稍待片刻。

（4）接通电源，注意醋酸纤维素薄膜上的正、负极，切勿接错。电压90～150V，电流0.4～0.6mA/cm（不同的电泳仪所需电压，电流可能不同，应灵活掌握），夏季通电45min，冬季通电时间稍长，约为60min，电泳区带展开约25～35mm即可。

（5）染色：通电完毕，取下薄膜直接浸于丽春红S染液或氨基黑10B染色液中，染色5～10min（以白蛋白区带染透为止），然后在漂洗液中漂去剩余染料，直至背景无色为止。

（6）定量：

①比色法：将漂洗的薄膜吸干，剪下各染色的蛋白区带入相应的试管中，在白蛋白管中加0.4mol/L氢氧化钠6ml（计算时吸光度乘以2），其余各管加3ml，振摇数次，置37℃水箱20min使其色泽浸出。氨基黑10B染色用分光光度计在620nm处读取各管吸光度，然后计算出各管的含量（同时做空白管对照）。

丽春红S染色时浸出液用0.1mol/L氢氧化钠，加入量同上法。10min后，白蛋白管内加400ml/L醋酸0.6ml（计算吸光度时乘以2），其余各管加0.3ml，以中和部分氢氧化钠，使色泽加深，必要时离心，取上清液用分光光度计在520nm处读取各管的吸光度（同时作空白对照），然后计算各自的含量。

②光密度计扫描法：A.透明：吸去薄膜上的漂洗液（为防止透明液被稀释影响透明结果），将薄膜浸入透明液中2～3min，然后取出，以滚动的方式平贴于洁净无划痕的载物玻璃片上（切勿产生气泡），将此玻片竖立片刻，除去多余透明液后，置于恒温90～100℃的烘箱内，烘烤10～15min，取出冷却至室温，用此法透明的各蛋白区带鲜明，薄膜平整，可供直接扫描和永久保存（用氢萘或液体石蜡透明，应将漂洗过的薄膜烘干后进行透明，此法透明的薄膜不能存久，且易发生皱折）。②扫描定量：将已透明的薄膜放入全自动光密度计或其他光密度计暗箱内，进行扫描分析。

血清脂蛋白和血清脂蛋白电泳——检查项目结果解读：