胃癌免疫治疗研究有新进展

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日前，一项国家自然科学基金资助项目——构建以胃癌MG7-Ag模拟表位为基础的DNA疫苗，在第四军医大学西京医院全军消化病研究所完成。这项研究成果为胃癌的免疫治疗提供了一条新途径。

近年来，肿瘤疫苗的研究已成为肿瘤免疫治疗研究的热点领域。将编码肿瘤抗原的基因克隆入真核表达载体构建的DNA疫苗具有容易大量制备、诱导免疫反应广谱、高效、持久等优点，已得到广泛研究和应用。而胃癌作为消化系统常见的恶性肿瘤，由于缺少特异性抗原，目前尚未研究出一种有效的疫苗。胃癌MG7-Ag是西京医院全军消化病研究所发现的一种特异性较好的胃癌标记物，并已初步证实可以诱导抗肿瘤免疫。

为构建以胃癌MG7-Ag模拟表位为基础的DNA疫苗，该所研究人员将HindⅢ酶切位点、MG7-Ag模拟表位和通用性辅助性T细胞(Th细胞)位编码序列的反向互补序列顺次设计于下游引物中，通过两次聚合酶链式反应将两种表位连接于一段载体基因，HindⅢ酶切位点位于载体片段与表位基因之间，将目的基因插入pUCm-T载体。酶切鉴定和序列测定证实后，利用pUCm-T载体和pcDNA3.1(+)载体共有的Kpn1和Xba1酶切位点，将目的基因亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)载体。酶切鉴定后，利用目的基因和pcDNA3.1(+)载体上的HindⅢ酶切位点，HindⅢ酶切除去载体基因片段，得到胃癌MG7-Ag模拟表位和通用性Th细胞表位的真核表达载体。结果经序列测定证实：PCR产物为载体基因、HindⅢ酶切位点、MG7-Ag模拟表位及通用性Th细胞表位的融合片段，最终得到的重组pcDNA3.1(+)质粒含有正确编码的以上两种表位的基因片段。他们将MG7-Ag模拟表位和一种通用性Th细胞表位PADRE的基因克隆入pcDNA3.1(+)真核表达载体，构建了以胃癌MG7-Ag模拟表位为基础的胃癌DNA疫苗。

据该所研究人员介绍，他们希望能利用PADRE高效辅助作用的DNA疫苗制备容易，诱导免疫持久、广谱的特点，研制出一种新型的胃癌疫苗应用于胃癌免疫治疗。