新冠病毒核酸常用什么方法检测

核酸检测,是指通过特殊的技术手段检测临床样本中是否存在特定的病原体核酸,从而诊断患者的感染原因。那么新冠病毒核酸常用什么方法检测呢?

1、荧光定量PCR检测技术

目前新冠病毒实验室检测最常用的是荧光定量PCR检测技术。通过全自动核酸提取设备的应用和实验过程的不断优化,相较于新冠肺炎发生的早期,国内检测能力得到了很大提升,检测耗时也从原先的5-6小时减少到约2-3小时。整个检测需要在生物安全2级标准实验室中,由熟练的检测人员操作高通量PCR扩增仪完成。

2、CRISPR-Cas技术

相较于目前已经在市场上占主导地位的荧光定量PCR检测技术,新冠病毒的核酸检测还有其他方法,最为前沿的是CRISPR-Cas系统的基因编辑技术。两者的相似之处都是通过检测荧光标记物来让仪器识别出新冠病毒,原理却完全不同。

CRISPR是原核生物基因组内的一段重复序列,原核生物中还有一种Cas蛋白,属于一种核酸酶,当和CRISPR序列特异性结合后,Cas蛋白的酶活性增加,就可以对CRISPR序列进行结合,也可以对系统中的其他核酸序列进行剪切。

采用CRISPR-Cas系统检测新冠病毒基因物质片段的过程是:如果样本中存在新冠病毒遗传物质,那么特定的Cas蛋白就与病毒特异性双链结合,使得Cas蛋白酶活化,去切割新冠病毒的特异性探针。一旦探针和新冠病毒的RNA结合后被Cas蛋白切割,探针所携带的荧光分子就可以大量产生,被检测仪器所捕捉。

总而言之,CRISPR-Cas检测系统规避了PCR的扩增循环,因此速度比PCR快许多,而且在成本不高的情况下特异性(即准确度)更高,可以对于一个碱基的差别进行有效的识别。

3、核酸等温扩增技术

中国疾病预防中心病毒病预防控制所成功研制新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸等温扩增快速检测试剂盒,可在8-15分钟内出结果,极大缩短检测时间,配套等温扩增仪器可自动判读结果。本试剂盒通过病毒病所新型冠状病毒盲样考核标本盘验证,和商业化的荧光定量PCR试剂盒比较,成本价格较低、灵敏度和特异性均为100%。这为疑似新型冠状病毒感染者筛查,早发现、早隔离,及时阻断病毒的传播提供了更便利的技术支持,具有在基层检验机构推广应用的价值。