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脑脊液环磷腺苷的基本信息
1、定义
环磷酸腺苷是体内一种具有广泛生物效应的物质,在脑组织和脑脊液中含量更高。因此当脑和脑膜疾患时,由于细胞代谢紊乱可导致脑脊液中cAMP含量的改变,检测cAMP可能较蛋白质、葡萄糖和细胞计数等指标更敏感。
cAMP是一种小分子半抗原,其特异性抗体是以人工合成的2-O-ScAMP-BSA结合物免疫动物所获得。抗体对2-O-位有取代基的cAMP的亲和力较无取代基的cAMP约大100倍。为提高测定方法的灵敏度,测定时应将[3H]标记cAMP,样品和标准同时进行琥珀酰化反应,然后和抗体反应。从标准曲线查出样品中的浓度。
2、专科分类
无
3、检查分类
脑脊液检查
4、适用性别
男女均适用
5、是否空腹
空腹
脑脊液环磷腺苷的正常值和临床意义
1、正常值
(8.7±3.3)pmol/L。
2、临床意义
异常结果:
增高:见于细菌性脑膜炎、脑出血或蛛网膜下腔出血、脑梗死、髓母细胞瘤、脑囊虫病,脊髓压迫症产生实质性损害时。
减低:见于脑萎缩或陈旧性脑损伤。 脑脊液中cAMP变化较比血液中cAMP变化更具有特异性。
需要检测的人群:高烧(>40℃)、颈部僵硬、严重头痛、食欲不振、意识不清、呕吐、抽搐、倦怠、思睡、对光敏感、小血斑於皮、皮肤疹的人。
脑脊液环磷腺苷的检查过程及注意事项
1、检查过程
脑脊液采集:取脑脊液3ml,即刻加至预先放有0.25mol/L EDTA Na2 50μl的冷试管中,迅速混匀,离心(3500r/min)10min,放-20℃保存。取脑脊液1ml至提取管中,加无水乙醇3ml,置快速混匀器上1min,离心,上清液倾至15ml蒸发皿中,向沉淀物中加75%乙醇3ml重复提取一次。上清液合并,置55℃水浴上吹干。残渣溶于0.5ml 50mmol/L pH6.2醋酸盐缓冲液。
组织样品处理:活组织取得后即刻置氮气中,快速称取30~50mg于研磨器中,加50mmol/LpH6.2醋酸盐缓冲液1ml,制成匀浆后即刻放沸水浴中3~5min。离心,取上清液放-20℃保存。
标准工作液:取标准cAMP一瓶,加50mmol/L pH6.2醋酸盐缓冲液1ml。另取试管7只,各加50mmol/L pH6.2醋酸缓冲液0.5ml,从标准液中吸出0.5ml至第一管,依次作倍比稀释。此系列标准液50μl中含有0.125~8pmol。临用前稀释。
10mm×100mm玻璃试管,NSB管加缓冲液150μl,S0管加缓冲液50μl,S1~7管加不同浓度标准液50μl,测定管加待测样品50μl。
向每管加酰化试剂10μl,即刻用力摇5~10s。各管加[3H]-SCAMP液50μl。
除NSB管外,各加抗血清100μl。混匀,放4℃反应2.5h。向每管加冷缓冲液1ml。
将反应液滴加至联接抽气泵的微孔滤膜上抽滤,再加2ml冷缓冲液洗涤反应管,亦加至膜上抽滤。取下滤膜,放80℃30min。
将滤膜放至预先加有5ml闪烁液的计数瓶中,放2h后在自动液体闪烁测量仪上测放射性。
以B0/B为纵坐标,标准管浓度为横坐标,在普通方格纸上作图,可得y轴截距为1的直线。依样品管的B0/B值,从标准曲线上得至相对应的浓度。再乘10得cAMPnmol/L。
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