混合淋巴细胞培养试验

文章目录

一、混合淋巴细胞培养试验的基本信息

1. 定义

2. 专科分类

3. 检查分类

4. 适用性别

5. 是否空腹

二、混合淋巴细胞培养试验的正常值和临床意义

1. 正常值

2. 临床意义

三、混合淋巴细胞培养试验的检查过程及注意事项

1. 检查过程

2. 注意事项

四、混合淋巴细胞培养试验的相关疾病和症状

1. 相关疾病

2. 相关症状

五、混合淋巴细胞培养试验的不适宜人群和不良反应

1. 不适宜人群

2. 不良反应

混合淋巴细胞培养试验的基本信息

1、定义

混合淋巴细胞培养试验(mixedlymphocyteculture,MLC)是一种测定受体和供体主要组织相容性抗原(HLA抗原)相容程度的试验方法,常用于器官移植前的组织配型。混合淋巴细胞培养将供者与受者的淋巴细胞做双向混合培养,或者灭活供者的淋巴细胞做向混合培养,细胞反应的程度与供-受者相容的程度呈负相关的试验。

2、专科分类

生长发育检查

3、检查分类

免疫检查

4、适用性别

男女均适用

5、是否空腹

非空腹

混合淋巴细胞培养试验的正常值和临床意义

1、正常值

形态计数法: 转化率<10%;同位素计数法:比较cpm得出P>0.05。

2、临床意义

混合淋巴细胞培养试验为与供-受者相容的程度呈负相关的试验。异常结果:肾移植时,活体供肾者的转化率应<10%;尸体供肾者的转化率应为>10%。只能在同一批实验中选用低反应配组。淋巴细胞转化率10%者为不同两个体间的组织是相容的。淋巴细胞混合培养试验用以检测患者的免疫状态。T淋巴细胞数减少时,转化率也降低。 可作为器官和骨髓移植的配型方法之一,用来选择合适的供体。如转化率高为供受者分歧用。转化率低,移植后的成功率高。

混合淋巴细胞培养试验的检查过程及注意事项

1、检查过程

供体淋巴细胞的制备:

新鲜外周静脉血按1∶1比例加在装有比重为1.077的淋巴细胞分离液的离心管中,轻稳加在液面上。 2000 r/min离心20 min,吸取中间雾状淋巴细胞层。 生理盐水洗涤2次。 台盼蓝染色,计数板计数。 调整细胞密度为2×109/L,分成3管,各自离心,留取沉淀。 每管中加入250 μL丝裂霉素(终浓度50 mg/L)和1.75 mL生理盐水,37℃水浴40 min, 生理盐水离心洗涤2次。 用含100 mL/L胎牛血清的RPMI 1640液调整细胞密度为1×1010/L.加入抗体封闭抗原。标记为D。

受体淋巴细胞的制备:

新鲜外周静脉血按1∶1比例加在装有比重为1.077的淋巴细胞分离液的离心管中,轻稳加在液面上。 2000 r/min离心20 min,吸取中间雾状淋巴细胞层。 生理盐水洗涤2次。 用含120 mL/L胎牛血清的RPMI 1640培养液调整细胞密度为1×1010/L. 标记为R。

混合淋巴细胞培养:

将已制备好的R和D按如下分组加入96孔板,置37℃,50 mL/L CO2孵箱中培养24 h. A组:R 50 μL+D 50 μL;B组:R 50 μL+D 50 μL+IL?2纯化中和mAb 15 μL;C组:R 50 μL+IL?2纯化中和mAb 15 μL;D组:R 50 μL. 每组3个复孔,空白对照组为RPMI 1640培养液100 μL。